Spécificité des actions enzymatiques : Les glycosidases

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être envisageable pour ce diholoside selon les fonctions réductrices mis en jeu dans la liaison osidiques.

Résultats du test à la liqueur de Fehling

Il nous reste à déterminer les carbones mis en jeu dans la liaison osidique grâce au résultats du test de liqueur de Fehling.

Lors du test à la liqueur de Fehling ,nous n’avons pas observer de réaction ,la solution étant rester bleu(non réaction du cuivre présent dans la liqueur) ,nous déduisons qu’il n’y a pas de pouvoir réducteur mis en jeu .Ceci veut dire que les deux oses sont liés par leur carbone anomérique et non par une liaison 1-4.Le premier ose (glucose ) étant de type pyrane c’est le carbone en position 1 qui est dans la liaison qui est liés au deuxième ose (fructose) de type furane par son carbone anomérique en position 2

résultats et interprétation du test de fiabilité de la micro-pipette :

pour des volume nominaux de 200µl et 1000µ nous allons calculer la justesse et la répétabilité de celui-ci grâce aux valeurs expérimentale et valeurs théorique .cf annexe feuille de résultat

volume nominal 1 à 200µL : la moyenne obtenue x=Σ xi /n

↔ x= ’199+202+203+199+197+210+196+205+201+196)/10=201µl

écart-type : s=√(Σ(x-xi)²/(n-1)) ↔ s=√(((201-199)²+(201-202)²+(201-203)²+(201-199)²+(201- 197)²+(201-210)²+(201-196)²+(201-205)²+(201-201)²+(201-196)²)/(10-1))) =4,42µl

on peut dire que les valeurs suivent un écart de x+=201+4,42 µl

erreur type de la moyenne (justesse) : Sm =s/√n=0,00442/√10=0,00119µl=1,4µl

pour 200µl de volume nominal la justesse de 1,4 µl nous donne 0,7% or selon la norme 8655-2 pour un volume nominal de 200µl la justesse doit être inférieur ou égale a 0,8% ce qui est notre cas

coefficient de répétabilité : CV=100* (s/x) =100*(4,42 /201) =2,1%

ici nous voyons que le coefficient de répétabilité ne suis pas la norme car supérieur a 0,4% qui est la valeur conseillé pour un volume nominale à 200µl .ceci reflète une erreur aléatoire élevé a chaque mesure.

Volume nominal 2 à 1000µL : la moyenne obtenu x=Σ xi/n =983,9µL

écart-type:s=√(Σ(x-xi)²/(n-1))=9,8µL

l’écart dans la moyenne suit x+=983,9+9,8µL

erreur type de la moyenne : Sm=s/√n=3,1µL

pour 1000 µL de v7olume nominal la justesse de 3,1µL nous donne 0,31% or la norme nous demande d’être en dessous de 0,8% nous avons donc une bonne valeur

coefficient de répétabilité ; CV=100*(s/x)=0,99%

ici nous avons un coefficient de répétabilité qui ne respecte pas la norme de 0,3% pour un volume nominale de 1000µL encore une fois.

Pour les deux volume nominaux nous obtenons donc des précision (justesse) fiable car celle-ci respecte la norme , cependant l’erreur aléatoire(répétabilité) pour les deux volume nominaux dépasse les valeurs recommander par les normes

CONCLUSION

-Ainsi après une hydrolyse par 4 enzyme initialement connus d’un diholoside inconnu, les calculs des rapports frontaux ainsi que leurs confrontation après une Chromatographie sur couche mince nous on permis de déterminer les oses présent dans notre diholoside .pour trouver la structure de notre diholoside il nous a fallu mettre en évidence le type de liaison osidique dans ce composé.Un test à la liqueur de Fehling à donc été nécessaire mettant en évidence un pouvoir réducteur éventuel .Nos calculs justifiant la non-présence de ce pouvoir réducteur,Nous avons conclu que les deux composés α-D-Glucosepyranose et β-D-fructofuranose sont obligatoirement liés par leur carbone anomérique .Ce diholoside ce caractérise avec le nom α-D-Glucopyranosyl (1-2) β-D-Fructofuranoside.

-Deuxièmement nous avons réalisé une série de mesure avec une pro-pipette P1000 selon 2 volume nominal pour ensuite en calculer l’erreur systématique et l’erreur aléatoire.On a pu observe que la pro-pipette à notre disposition était fiable et précise selon les normes recommander mais qu’elle nous donnait une erreur aléatoire conséquente et donc que les volume était très dispersé autour de la moyenne des volumes distribués.