Quel est le phénomène mis en évidence par l’ensemble des expériences qui précèdent ?

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Avec les informations dont vous disposez comment définiriez-vous ce centre de Nieuwkoop au niveau moléculaire ?

Correction : Le centre de Nieuwkoop va être situé dans la partie végétative en position dorsale. La protéine qui est exprimée uniquement en côté dorsal va être la β-cathénine. Les protéines qui vont êtres exprimées uniquement dans la région végétative vont être Vg1 et VegT.

Donc le centre de Nieuwkoop va être la région où il va y avoir expression de Vg1 et de VegT et de la β-cathénine.

Juste avant la fécondation DSH (disheveled) va se trouver au pôle végétatif mais sous forme inactive. Ensuite après la fécondation il va y avoir une rotation cortical et les protéines DSH vont subir une rotation de 30 ° environ elles vont donc se retrouver en position dorsale et en plus elles vont être activées. Le rôle de la protéine DSH va être d’inhiber la protéine GSK3 (qui permet via le protéasome de dégrader la β-cathénine). Donc en région dorsale il va y avoir une inhibition de la GSK3 et donc la présence de la β-cathénine qui va pénétrer dans le noyau de la membrane nucléaire pour servir de facteur de transcription. Du côté ventral il n’y a pas de DSH il ne va donc pas y avoir inhibition de GSK3 et donc GSK3 va dégrader la β-cathénine via le protéasome. Côté dorsal la β-cathénine va servir de facteur de transcription au gène siamois et du côté ventrale le gène siamois ne va pas être transcrit il va être « réprimé ». Il va donc y avoir synthèse de protéines siamois qui vont servir de facteur de transcription au gène goosecoid. Cette voie de signalisation va aboutir à la mise en place de l’organisateur de Spemann.

Le gène siamois va être exprimé du côté dorso-végétatif et plus précisément partout où il y a de la β-cathénine.

3) De l’endoderme vers le mésoderme

3.1) L’activine

Quelle expérience de votre cours vous rappelle ce résultat ?

Correction : L’expérience de Monsieur Spemann et Mangold cette expérience à reçu un prix Nobel. Ils ont greffés une lèvre blastoporale dorsale en région ventrale (greffe ectopique) et ils ont obtenus deux régions dorsales donc un embryon à deux têtes. Ici la greffe à été effectuée uniquement côté ventrale donc on ne peut pas retenir l’expérience du lithium car elle a été effectuée sur tout un embryon. Spemann et Mangold ont également pris des greffons un peu partout sur la jeune gastrula et ils les ont greffés exactement au même endroit mais seule l’expérience avec la lèvre blastoporale dorsale à fonctionnée. Ils ont donc découvert la région organisatrice de Spemann car c’est une région qui va pouvoir organiser un nouvel axe qui va être l’axe dorsal.

Un gène ou une protéine qui n’est exprimé que par un tissu ou une cellule particulière va être un marqueur. Le gène Xhox 3 est un marqueur de l’actine latéral. Le gène gooscoïde est un gène spécifique de l’organisateur de Spemann.

Quel est l’intérêt d’utiliser des cellules dispersées ?

Correction : On va dispersées ces cellules de façon a se que les signaux de contact qui ont lieux entre deux cellules adjacentes ne puissent pas influencer la cellule. Les contacts intercellulaires ne vont donc plus avoir lieu. Mais on va disperser ses cellules de façon à permettre une meilleure diffusion de l’activine. Sa va synchroniser les cellules elles vont toutes y être exposées en même temps et en même concentration. Et donc on pourra étudier globalement la réponse des cellules de la calotte animale.

Si on enlève le Calcium il va y avoir certaines conséquences comme par exemple sur les cadhérines qui font partit des jonctions car se sont des jonctions qui sont dépendantes du calcium et quand elles n’en auront plus les liaisons vont se rompre mais si on rajoute du calcium les jonctions vont pouvoir se rétablir.

Sur la base des résultats reportés dans la figure 4, comment appelle-t-on une molécule comme l’activine ?

Correction : Quand on fait migrer des ARNm on effectue un Northen bloth.

L’actine du cytosquelette va nous servir de contrôle car l’actine est un gène de ménage qui est ubiquitaire car il est présent dans toutes les cellules. Car les cellules possèdent toutes un cytosquelette donc toutes les cellules possèdent de l’actine du cytosquelette. La ligne du bas toutes les bandes vont devoir être d’égale quantité de façon à se qu’on soit sûre d’avoir déposé la même quantité d’ARNm.

L’activine est un morphogène parce que les résultats que l’on obtient vont dépendre de la concentration en activine que l’on a mis initialement dans le milieu de culture. On constate que selon la concentration en activine il va y avoir un effet sur les cellules car les cellules se sont différenciées en différentes chose car elles vont exprimer des marqueurs différents en fonction de la concentration en activine.

A la lumière des informations qui vous sont fournies, quels sont les éléments trans-régulateurs intervenants dans le contrôle de l’activité du gène goosecoïd ?

Correction : Les autres trans-régulateur de goosecoid vont être siamois et l’activine.

Si les observations faites in vitro traduisent la réalité in vivo, comment sont répartis les facteurs protéiques de la famille des TGF dans la région des macromères ?

Correction : On va trouver plus d’activine dans la région de l’organisateur de Spemann, car goosecoid est le marqueur de l’organisateur de Spemann et que le gène goosecoid est celui qui va lui plus permettre l’expression de l’activine. Donc la plus grande concentration d’activine devrait se trouver en région dorso-végétative. On s’attend donc a une forte concentration d’activine côté dorsal et à une concentration décroissance côté ventrale.

L’emploi d’une sonde appropriée montrerait que l’ARNm activine dans la blastula du Xénope est uniformément répartit dans l’hémisphère végétatif : comment conciliez-vous l’ensemble de ces données ?

Correction : L’hypothèse serait qu’il y a des ARNm activine partout donc des protéines activine partout en même concentration et il y aurait des protéines inhibitrice ou destructrice du côté ventrale qui ferai que la protéine active